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首頁-譜標服務-如何安裝和使用安捷倫液相色譜柱?

如何安裝和使用安捷倫液相色譜柱?

發布時間:2018-07-18       點擊次數:14027

液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成,其中安捷倫液相色譜柱的正確安裝和使用,是液相色譜工作的關鍵.

安捷倫液相色譜柱的結構:

   柱接頭采用低死體積結構,柱接頭是兩端螺紋組件,一端是為7/16英寸外螺紋,另一端是3/16英寸的內螺紋。7/16英寸外螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接,中間放置壓壞用于密封。3/16英寸的內螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接,中間也放置壓環用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積,在安裝色譜柱時,用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環后要盡量插到底,然后再擰緊空心螺釘。壓環被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上.

    在兩端柱接頭內,柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片或濾網,用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失??罩鹘M件均為316#不銹鋼材質,能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。

安捷倫液相色譜柱的安裝: 

按柱管上標示的流動相流向,將色譜柱的入口端通過連接管與進樣閥出口相連接,柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管,連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環,在接管時一定要設法降低柱外死體積,連接管通過空心螺釘、壓環后盡量用力插到底,然后順時針擰緊空心螺釘,直到擰不動為止,再用扳手繼續順時針擰1/4-1/2圈,切記不要用力過大,如色譜柱通過流動相加壓后有漏液現象,請用扳手繼續順時針擰1/4圈,直至不漏液為止。

 

安捷倫液相色譜柱的使用:

色譜柱在使用前,最好進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行,只有這樣,測得的結果才有可比性。

  1. 樣品的前處理:最好使用流動相溶解樣品;使用予處理柱除去樣品中的強極性或與柱填料產生不可逆吸附的雜質;使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質。
  2. 流動相的配制:液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點:流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中;流動相具有一定惰性,與樣品不產生化學反應(特殊情況除外);流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命;流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器,最好使用對紫外吸收較低的溶劑配制;流動相沸點不要太低,否則容易產生氣泡,導致實驗無法進行;在流動相配制好后,一定要進行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發生作用。
  3. 流動相流速的選擇:因柱效是柱中流動相線性流速的函數,使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。對內徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對于內徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。當選用最佳流速時,分析時間可能延長??刹捎酶淖兞鲃酉嗟南礈鞆姸鹊姆椒ㄒ钥s短分析時間。
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