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二手串聯質譜lcmsms及二手液質聯用lcms技術廣泛用于藥代動力學

發布時間:2019-04-24       點擊次數:10329

近年來,隨著質譜技術以及聯用接口技術特別是包括電噴霧電離和大氣壓化學電離在內的大氣壓電離接口技術的突破,串聯質譜及液質聯用技術在藥物及其代謝物的定量和定性研究中發揮了極其重要的作用!由于串聯質譜及液質聯用技術的優越性,目前已廣泛應用于藥代動力學和藥物代謝研究中。這里介紹串聯質譜及液質聯用技術在藥代動力學的應用。
1,極大提高了分析方法的靈敏度
利用二手液質聯用LC -MS 法成功建立了Beagle 犬血漿中人參皂苷20(R )-Rh 2的定量方法,并進行了藥代動力學研究,結果測得20(R)-Rh 2在Beagle 犬血漿中最低定量限為015ng Πm L ,20(R )-Rh 2在015~200ng Πm L 濃度范圍內線性關系良好(r 2=019998)。
2,提高了分析方法的特異性和選擇性 
傳統的分析方法缺點之一在于檢測的特異性差,選擇性差。通過串聯質譜的分子離子和其特征碎片離子的質譜色譜圖能分別進行定量,且定量的結果十分可靠。以二手串聯質譜LC -MS-MS 同時測定了血漿中奧馬曲拉及其中代謝物以及5中同位素內標,共10種化合物。
3,實現藥代動力學研究的高通量化,提高工作效率 
在進行臨床藥代動力學研究時,經常需要在規定的時間內完成大批量生物樣品的制備和分析。由于串聯質譜固有的高靈敏度和特異性,能從復雜的生物基質中選擇性地測定目標待測物,因此大大簡化了樣品制備和分離過程。另外,串聯質譜對許多新技術表現出的兼容性,使得串聯質譜在PK 研究的高通量化上表現出了極大的應用價值。這些技術包括在線固相萃取、柱切換技術和混合功能離子檢測技術等。

 

                               

(1)在藥代動力學研究中的定量分析及應用
(2)二手串聯質譜LC -MS -MS 方法建立的基本流程 
建立用于體內藥物定量分析的LC -MS -MS 方法時,首先應該了解藥物在生物基質中的特點。人體(或動物)在接受藥物后,藥物經吸收、分布、代謝(生物轉化)、排泄等過程后,在體液中有濃度低,代謝復雜且代謝產物多等特點。因此,建立體內藥物的定量方法時,其基本流程為了優化質譜參數建立合適的質譜條件以提高檢測的靈敏度和特異性;優化色譜系統建立最優化的色譜系統以實現更有效的分離;優化樣品制備方法以從復雜的生物基質中有效提純藥物。
4.二手串聯質譜LC-MS-MS方法在藥代動力學研究的應用 
1>采用高效液相色譜串聯線性離子阱質譜同時檢測五味子提取物中四種主要成分,采用電噴霧離子源,多反應監測模式進行檢測。結果血漿樣品經甲醇沉淀、高速離心后進行分析,各成分在0101~210μg-m L的濃度范圍內線性關系良好,最低定量限為0101~ 0102μgΠm L,建立了專屬性強、快速、靈敏、可靠,可滿足五味子提取物中四種主要成分藥代動力學研究要求的LC-MS-MS方法。2>利用高效液相色譜-質譜檢測方法,研究秋水仙堿片的人體藥動學。血漿樣品011m L,經乙醚-二氯甲烷萃取,以ZOR BAX Ex2 tend-C18為色譜柱,流動相為甲醇-10mm ol-L乙酸銨,流速為111m LΠm in;采用質譜電噴霧離子化法,正離子多重反應檢測(MRM)。結果秋水仙堿濃度在0105~10μg-mL范圍內線性關系良好;平均回收率分別為(92147±1173)%;日內RS D≤2199%,日間RS D≤2122%,建立了適用于人血漿秋水仙堿濃度的測定及其藥代動力學研究的簡便、快速、準確可靠的液質聯用方法。3>同時測定大鼠血漿中白藜蘆醇苷及其代謝產物白藜蘆醇的液相色譜-串聯質譜方法。以Lichrospher C18色譜柱為分析柱,乙腈-水為流動相,采用電噴霧離子源(ESI),以多反應監測(MRM)模式檢測,內標法定量,用于定量分析的離子反應分別為ml-z389-227(白藜蘆醇苷)和m-z227-143 (白藜蘆醇)。在選定的樣品預處理、色譜及質譜條件下,白藜蘆醇苷、白藜蘆醇及內標物能夠達到基線分離而且離子化效果好。用LC-MS-MS法檢測大鼠血漿中的白藜蘆醇苷及其代謝產物白藜蘆醇,線性范圍014 ~200μg-mL。

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