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常見的色譜法有哪些?分別有哪些特點?

發布時間:2021-12-22       點擊次數:7582

常見的色譜法有哪些?分別有哪些特點?

紙色譜——浸泡在液體中的紙用作固定相,而液體溶劑用作流動相。紙張干燥后,分離的成分會在紙上顯示為斑點。

 

液相色譜——該技術使用二氧化硅和氧化鋁作為固定相,有機溶劑作為流動相。

 

薄層色譜法——在這里,塑料或玻璃片上涂有一薄層吸附劑,如氧化鋁(Al2O3)或二氧化硅(SiO2)。組分根據其對吸附劑的親和力進行分離,并在色譜分離后在紙上顯示為單個斑點。

 

柱色譜——柱色譜類似于薄層色譜,使用相同的固定相和流動相。不同之處在于,兩個相都包含在一個垂直的玻璃柱中,分離過程非常耗時。

 

氣相色譜——在氣相色譜中,惰性氣體(氦氣、氮氣、氬氣)用作流動相,通常由硅聚合物組成的固體或液體作為固定相。樣品混合物被引入襯有固定相的柱中,并被選擇性吸附。當分離的分子離開色譜柱時,使用檢測器進行識別。

高效液相色譜——高效液相色譜是柱色譜的高級形式。在高效液相色譜中,樣品混合物被引入流動相(通常是溶劑),然后在高壓下將其泵入緊密填充的分析柱中,以快速分離樣品分子。這種分離依賴于分子對流動相和包裹柱(固定相)的顆粒的親和力。也叫高壓液相色譜。親和色譜–該方法用于根據不同同源成分(如酶和底物、抗原和抗體或受體和配體)之間的特定親和力分離生化混合物。

 

離子交換色譜——這是根據離子和極性分子對離子交換劑的親和力來分離離子和極性分子。它有助于蛋白質、氨基酸和核苷酸等帶電分子的分離。這里,流動相通常是導電溶液(由鹽濃度決定)。樣品分子對帶相反電荷的固體支持物的吸附由特定的離子性質驅動,例如分子上電荷的數量和位置。

 

分離包括不同的條件,如離子強度和酸堿度,以便溶質分子按其結合強度的順序從柱中釋放出來,弱結合的物質首先被洗脫。

 

 

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