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首頁-譜標服務-AB Qtrap 5500在蛋白質組學定量分析中的新技術及其新應用

AB Qtrap 5500在蛋白質組學定量分析中的新技術及其新應用

發布時間:2023-11-22       點擊次數:1275

高效實現強大的MRM3定量方法

AB Sciex公司推出的Qtrap 5500系統具備高的靈敏度、好的阱內裂解效率、快的掃描速度以及更快的MRM3掃描方式。在分析生物樣品時,樣品一般都較為復雜,所以在某些特殊的情況下,分析人員需要選擇性更高的檢測技術,MRM3技術便能夠幫助分析人員解決上述問題。

所謂MRM3掃描方式就是通過Qtrap 5500質譜系統與液相色譜相配合,在Q1選擇一個前體離子,在Q2中將該離子進行碎裂,與MRM掃描方式不同在于MRM3掃描方式是將所有的碎片離子聚集在線性加速離子阱中,之后,在離子阱中以高達10K20KDa/Sec的速度掃描特定的二代碎片離子,從而獲得MRM3譜圖。

(1)MRM掃描背景噪音較高,或譜圖中有干擾峰存在;(2)通過更換流動相、優化液相色譜條件、選擇不同的MRM離子對、選擇不同的離子化方式等這些簡單方法無法消除背景噪音;(3)與背景噪音相比,沒有特定的MRM子離子可用,在遇到上述這些干擾和困難時,MRM3就是一種有效的定量策略。

脂質分析

脂類物質是細胞膜的重要組成成分,在細胞功能上扮演著重要的角色,所有的脂類都有一個極性頭部和熟睡的尾巴,或至少是代謝后生成此類分子。作為細胞能量儲存,并且參與細胞間的信息交換。了解脂類代謝途徑有益于設計高效且副作用小的藥物,對于生物體生理過程和藥物設計有著重要的意義。譬如阿司匹林、布洛芬與脂類代謝相關,降低膽固醇的他汀藥物,也能戲劇性的改變脂類代謝。

傳統研究脂類物質的技術方法包括有:薄層層析、氣相色譜以及氣質聯用技術。氣質聯用技術通常分析經分離純化的脂類衍生物,但衍生化方法通常易導致脂類發生變化,破壞了脂類分子的完整性。

液質聯用技術可以解決上述問題,幫助分析人員鑒定脂類、了解脂類類別、獲得脂類的表達譜、比較脂類表達譜、獲得結構信息、測定分子量以及代謝物定量。LC/MS/MS不同于GC/MS,它可使研究人員能夠觀察到完整的脂類分子,直觀地看到何種脂肪酸連接在頭部基團上。

多重全體離子掃描方式(MPIS)

多重全體離子掃描方式具體指指固定在Q3掃描某個碎片離子,通過分析檢測出哪個前體離子會產生出該碎片離子,并將該離子的信號記錄下來。通過這樣反復不斷地掃描,便可以推導出哪些前提離子將會產生某一個碎片離子。該方法的技術優勢在可對所有感興趣的脂類分子和內標分子進行平行檢測,圖譜了直觀解析并可以疊加用于復雜脂類的定性分析,可方便的從前提離子掃描切換到MRM掃描,用于脂類分子的定量分析。

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