依克那肽（Exenatide）是一個包含39個氨基酸殘基的肽（分子量為4186.6 Da），已被批準用于治療1型和2型糖尿病。該肽可以增強胰腺細胞的葡萄糖依賴性胰島素的分泌，從而調控葡萄糖的代謝。在過去的幾年里，血漿中依克那肽的定量分析通常是用配體-結合法來完成的。例如，藥物動力學研究中，常用酶免疫分析法定量依克那肽，但當基質中含有與待測物具有類似物理化學性質的干擾物時，該方法有時存在選擇性不夠的問題。QTRAP 5500 質譜系統MRM³定量技術可保證人血漿中依克那肽測定的高選擇性。

實驗方法：

樣品配置：依克那肽從血漿中提出，提取液用氮氣揮干，復溶。在所有的制備步驟中，溶液的pH值和有機相濃度須精準控制。

液相色譜：Shimadzu UFLC LC-20ACXR；反相色譜柱C-18 2.0×30 mm, 5μm；流速 0.6 ml/min；流動相A 為0.1% 甲酸水溶液；流動相B為0.1% 甲酸甲醇溶液；梯度洗脫，5min內，流動相B從2%增至95%；進樣量5μl。

質譜：使用AB SCIEX QTRAP 5500質譜系統，MRM³掃描方式。在MRM³掃描中，離子阱填充時間設定為動態填充時間（DFT），掃描速度10000Da/Sec，離子阱激發時間為25ms,每個質譜掃描循環時長0.17s。MRM3掃描的三級離子為838-396-202。

方法建立：

在增強一級質譜全掃描（EMS）模式下，依克那肽產生帶5個正電荷的離子，m/z838.3，該離子被選作母離子。該離子在增強子離子（EPI）掃描模式下碎裂，產生的主要子離子為m/z396.4。該一級子離子在線性離子阱中發生碎裂，產生MS3譜圖，其主要子離子為m/z202.2,上述三個離子被用來構建LC-MS MRM³定量方法。

結果與討論：

使用LC-MS MRM³分析血漿提取物中的依克那肽可以明顯地提高選擇性。通過給出的MRM³分析和傳統MRM分析所獲得色譜圖的比較，可以看出，MRM³色譜圖中基線較低，且沒有MRM色譜圖中的干擾峰。QTRAP 5500的掃描速度（10000Da/Sec）保證了有足夠的數據來獲得離子色譜峰，從而使得定量具有良好的重現性和準確度。