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首頁-譜標服務-高效液相色譜的須知問題

高效液相色譜的須知問題

發布時間:2024-03-21       點擊次數:777

液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因?

1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。

2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子。

3、可能柱超載,減少進樣量。

HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法是什么?

1樣品量不足,解決辦法為增加樣品量

2樣品未從柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子

3樣品與檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器

4檢測器衰減太多。調整衰減即可。

5檢測器時間常數太大。解決辦法為降低時間參數

6檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。

7檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。

8記錄儀測壓范圍不當。調整電壓范圍即可。

9流動相流量不合適。調整流速即可。

10檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,重作校正曲線。

怎樣解決HPLC分析時,柱壓不穩定,原因何在?

1泵內有空氣,解決的辦法是清除泵內空氣,對溶劑進行脫氣處理;

2比例閥失效,更換比例閥即可;

3泵密封墊損壞,更換密封墊即可;

4溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;

5系統檢漏,找出漏點,密封即可;

6梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。

出現峰展寬的原因

1樣品體積過大——用流動相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%

2在進樣閥中造成峰擴展——進樣前后排出氣泡以降低擴散。

3數據系統采樣速率太慢——設定速率應是每峰大于10點。

4檢測器時間常數過大——設定時間常數為感興趣第一峰半寬的10%

5流動相粘度過高——增加柱溫,采用低粘度流動相。

6檢測池體積過大——用小體積池,卸下熱交換器。

7保留時間過長——等度洗脫時增加強溶劑含量,也可用梯度洗脫。

8柱外體積過大——將連接管徑和連接管長度降至最小。

9樣品過載——進小濃度小體積樣品。

簡單判斷比例閥是否內漏?

設定泵使用一個單獨通路(A),打開Purge閥,流速5mL/min,提起其他溶劑瓶內的溶劑過濾頭直至離開液面,觀察這些通路(BCD)內的溶劑是否隨著流動,正常時均不應流動。

570319569

TEL:400-800-3875